放射免疫計數器是一種用于測量放射性同位素標記生物分子濃度的精密儀器,廣泛應用于醫學、生物化學、藥物研發及環境監測等領域。其核心原理基于放射性同位素的衰變特性,通過探測器捕捉標記分子釋放的γ射線或其他粒子,結合計數系統與數據處理軟件,實現目標物質的定量分析。
儀器主要由探測器、計數器、樣品艙及數據處理系統組成。探測器通常采用碘化鈉晶體或光電倍增管,將γ射線轉化為電信號;計數器負責記錄單位時間內的衰變事件數量;樣品艙確保待測樣本與探測器精準對接。操作時,需先將待測樣本(如血清、尿液)標記上放射性同位素(如¹²?I、³H),隨后樣本中的抗原或抗體與標記物結合,形成復合物。探測器捕捉復合物釋放的輻射信號,計數器統計信號頻率,最終通過標準曲線法或比較法,將計數率轉化為目標分子濃度。
一、環境與安全準備
檢查工作環境:
確保儀器放置在平穩、堅固、通風良好的實驗臺上。
周圍留有足夠空間(尤其是散熱區域),避免陽光直射和強電磁干擾。
工作區域應有明確的電離輻射警示標志。
個人防護:
操作人員必須穿戴實驗服、手套(建議使用一次性乳膠或丁腈手套)、口罩。
建議佩戴個人劑量計(如熱釋光劑量計TLD),監測累積輻射劑量。
準備好輻射應急處理工具,如鑷子、吸水紙、專用廢物容器等。
輻射安全檢查:
確認儀器的鉛屏蔽層完好無損,門蓋閉合嚴密。
檢查儀器周圍輻射水平(可使用便攜式輻射檢測儀),確保無異常泄漏。
二、儀器開機與自檢
開機:
連接電源,打開主電源開關。
啟動儀器和配套的計算機(如為電腦控制型)。
預熱:
按照說明書要求進行預熱,通常需要15-30分鐘。預熱可使探測器(通常為NaI(Tl)閃爍晶體)和電子線路達到穩定工作狀態,保證測量精度。
系統自檢(Power-On Self-Test):
儀器啟動后會自動進行硬件自檢,檢查探測器、高壓電源、計數電路等是否正常。
觀察顯示屏或軟件界面,確認無錯誤代碼或報警信息。
三、軟件與參數設置
啟動控制軟件:
打開配套的計數器控制與數據分析軟件。
創建或加載測量程序:
根據待測樣本類型(如TSH、Insulin等),選擇或創建相應的測量方法(Method)。
設置關鍵參數:
同位素選擇:如¹²?I(碘-125)或?¹Cr(鉻-51),儀器會自動優化能量窗口。
測量時間:設定每個樣本的計數時間(如60秒、120秒),高活度樣本可縮短時間,低活度需延長。
樣品類型:區分標準品(Standard)、質控品(QC)、未知樣本(Unknown)等。
樣品編號與位置:輸入或掃描樣品架編號,確保軟件與物理樣品位置對應。
校準設置(如需要):
確認儀器的能量校準和效率校準是否在有效期內。
如進行新項目或長時間未用,可能需要使用標準源進行重新校準(由專業人員操作)。
四、樣品準備與裝載
樣品檢查:
確認待測樣本(通常為試管或微孔板中的液體)已按放射免疫分析(RIA)流程完成反應和分離(如沉淀、離心)。
檢查試管是否完好、無泄漏、無破損,管壁清潔。
樣品架裝載:
將樣本試管按順序(通常為圓形或矩形排列)放入專用的樣品架中。
確保試管插入到位,避免傾斜或松動。
在軟件中輸入或確認樣品編號、類型等信息。
本底測量(可選但推薦):
放入一個空白管(僅含緩沖液或非放射性基質),作為本底對照。
測量本底計數率,用于后續數據校正。
五、儀器性能驗證
質控品測量:
在正式測量前,先運行高、低兩個水平的質控品(QC)。
檢查測量結果是否在允許范圍內,驗證儀器的精密度和準確度。
標準曲線驗證(如適用):
如果當天需要建立標準曲線,確保標準品已正確放置并測量。
六、其他準備
記錄本:準備好實驗記錄本,用于記錄測量時間、樣品信息、儀器狀態等。
清潔用品:準備好無絨布、70%酒精等,用于清潔儀器表面(切勿讓液體進入儀器內部)。
放射性廢物容器:準備好專用的、有屏蔽的放射性廢物桶,用于丟棄使用過的試管、吸頭、手套等。
